(Flow cytometry, FCM) nyaéta analisa sél anu ngukur inténsitas fluoresensi tina spidol sél anu patri. Téknologi téknologi luhur dikembangkeun dumasar kana analisa sareng asihan sél tunggal. Bisa gancang ngukur jeung mengklasifikasikan ukuran, struktur internal, DNA, RNA, protéin, antigén jeung sipat fisik atawa kimia sél lianna, sarta bisa dumasar kana kumpulan klasifikasi ieu.
Aliran cytometer utamana diwangun ku lima bagian handap:
1 Kamar aliran sareng sistem fluida
2 Sumber cahaya laser sareng sistem ngabentuk sinar
3 Sistim optik
4 Éléktronik, neundeun, tampilan sareng sistem analisa
5 Sistim asihan sél
Diantarana, éksitasi laser dina sumber cahaya laser sareng sistem ngabentuk sinar nyaéta ukuran utama sinyal fluoresensi dina aliran cytometry. Inténsitas cahaya éksitasi sareng waktos paparan aya hubunganana sareng inténsitas sinyal fluoresensi. Laser mangrupikeun sumber cahaya anu koheren anu tiasa nyayogikeun panjang gelombang tunggal, inténsitas tinggi, sareng katerangan stabilitas tinggi. Ieu sumber cahaya éksitasi idéal pikeun minuhan sarat ieu.
Aya dua lenses cylindrical antara sumber laser jeung chamber aliran. Lénsa ieu museurkeun sinar laser kalayan bagian melintang sirkular anu dipancarkeun tina sumber laser kana sinar elips kalayan bagian melintang anu langkung alit (22 μm × 66 μm). Énergi laser dina beam elliptical ieu disebarkeun nurutkeun sebaran normal, mastikeun inténsitas katerangan konsisten pikeun sél ngaliwatan wewengkon deteksi laser. Di sisi séjén, sistem optik diwangun ku sababaraha sét lenses, pinholes, sarta saringan, nu kasarna bisa dibagi kana dua grup: hulu jeung hilir chamber aliran.
Sistem optik di hareup chamber aliran diwangun ku lénsa jeung pinhole. Fungsi utama lénsa sareng pinhole (biasana dua lénsa sareng pinhole) nyaéta pikeun museurkeun sinar laser kalayan bagian melintang sirkular anu dipancarkeun ku sumber laser kana sinar elliptical kalayan bagian melintang anu langkung alit. Ieu ngadistribusikaeun énergi laser numutkeun sebaran normal, mastikeun inténsitas katerangan anu konsisten pikeun sél-sél di sakuliah daérah deteksi laser sareng ngaminimalkeun gangguan tina cahaya anu nyasar.
Aya tilu jinis utama saringan:
1: Long pass filter (LPF) - ngan ngamungkinkeun lampu kalayan panjang gelombang leuwih luhur ti nilai husus ngaliwatan.
2: Short-pass filter (SPF) - ngan ngamungkinkeun lampu kalayan panjang gelombang handap nilai husus ngaliwatan.
3: Bandpass filter (BPF) - ngan ngamungkinkeun cahaya dina rentang panjang gelombang husus ngaliwatan.
Kombinasi saringan anu béda-béda tiasa ngarahkeun sinyal fluoresensi dina panjang gelombang anu béda ka tabung photomultiplier individu (PMTs). Contona, saringan pikeun ngadeteksi fluoresensi héjo (FITC) di hareup PMT nyaéta LPF550 sareng BPF525. Saringan anu digunakeun pikeun ngadeteksi fluoresensi oranyeu-beureum (PE) di payuneun PMT nyaéta LPF600 sareng BPF575. Saringan pikeun ngadeteksi fluoresensi beureum (CY5) di payuneun PMT nyaéta LPF650 sareng BPF675.
Aliran cytometry utamana dipaké pikeun asihan sél. Kalayan kamajuan téknologi komputer, pamekaran imunologi sareng panemuan téknologi antibodi monoklonal, aplikasina dina biologi, ubar, apoték sareng widang sanésna janten langkung nyebar. Aplikasi ieu kalebet analisis dinamika sél, apoptosis sél, ngetik sél, diagnosis tumor, analisa khasiat ubar, jsb.
waktos pos: Sep-21-2023
